【產品介紹】
小鼠肝膽管類器官試劑盒(分化)是一種化學定義的細胞培養基,用于建立和培養從成體干細胞衍生的小鼠肝膽管類器官。肝膽管的自我更新上皮細胞是由位于肝臟的干細胞及其祖細胞的擴增所驅動的。肝膽管類器官因其上皮在結構、細胞類型組成和自我更新動力學方面的表現,而具有真實器官的特征。肝膽管類器官可以在分化培養基中誘導出肝樣細胞,為人類肝臟發育和疾病研究提供了前所未有的模型。
【使用方法】
小鼠肝膽管類器官試劑盒(分化)的使用說明
1.收到類器官培養基后,將培養基置于4℃冰箱進行解凍。
2.待培養基完全解凍后上下顛倒充分混勻,在生物安全柜或潔凈工作臺中根據日常需求量進行分裝,推薦類器官培養基分裝成10ml/管,因子B分裝為40μl/管。
3.分裝后的培養基請密封儲存于-20℃,使用時取出分裝的培養基放置室溫平衡后即可使用。
注意:
分裝后的類器官培養基儲存于-20℃,有效期兩年,注意避免反復凍融。
解凍后類器官完全培養基可在4℃儲存,建議在兩周內使用。
類器官培養基中內含有細菌及真菌抗生素。
小鼠肝膽管類器官的分化培養
1.原代肝膽管細胞接種完成后,在小鼠肝膽管類器官培養基(擴增)中培養3天,小心地從孔中吸出培養基,并加入新鮮的室溫平衡小鼠肝膽管(分化)類器官基礎培養基,不添加培養因子B,每天更換一次培養基。
2.使用小鼠肝膽管(分化)類器官基礎培養基培養9天后,配制小鼠肝膽管(分化)完全培養基(例如,10ml小鼠肝膽管(分化)類器官基礎培養基添加40μl培養因子B)。使用該完全培養基繼續培養小鼠肝膽管類器官3天,期間每天換液一次。
3.這個培養過程結束后,肝膽管類器官分化過程完成。肝膽管類器官會表達ALBUMIN、TTR、CYP3A4和MRP2等肝臟標志物。