適用范圍 | 試劑 |
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使用方法 | 1. 將試劑盒各組分置于冰上或 4℃,確保充分融化后開始操作。
2. 取適量待檢細(xì)胞培養(yǎng)上清于潔凈的 PCR 管中,利用水浴鍋 95℃熱處理 5 min。 3. 將處理過的樣本 12000 rpm 離心 5 min。 4. 將上清轉(zhuǎn)移到新的 PCR 管中即可作為 PCR 反應(yīng)模板。 5. 融化并混勻 PCR 反應(yīng)所需的各種溶液。在冰浴上配置 PCR 反應(yīng)體系。 (注:可根據(jù)需要,每次實(shí)驗(yàn)加上一個(gè)陰性對(duì)照、一個(gè)陽性對(duì)照。) 6.設(shè)置PCR反應(yīng)程序。 7. 制作 1%的瓊脂糖凝膠(現(xiàn)配現(xiàn)用),待其凝固后加 5μL 擴(kuò)增產(chǎn)物,100V 電泳 25 min (可根據(jù)不同電泳儀適當(dāng)調(diào)整參數(shù))。電泳結(jié)束后使用凝膠成像儀檢測(cè) PCR 產(chǎn)物帶。 8. 結(jié)果分析: 若檢測(cè)樣本中有 520bp 左右的條帶,則說明樣本被支原體污染,若沒有該條帶,則說明樣本 沒被支原體污染 |
注意事項(xiàng) | 1. 電泳區(qū)域需嚴(yán)格與樣品配置區(qū)域隔離,建議電泳區(qū)域操作人員與加樣區(qū)域人員進(jìn)行區(qū)分。 配制人員需穿戴整齊,戴好口罩、手套和穿好潔凈服,盡量不要說話防止口腔中的支原 體污染。 2. 試劑盒內(nèi)所有組分建議在低溫環(huán)境融化后使用,且需確保其充分融化,各組分使用前需 充分混勻,以保證試劑的均一性,經(jīng)混勻的試劑需經(jīng)短暫離心,以使管壁及蓋子上的液 體全部集中于管底。 3. 最終的試驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、操作者的操作方法及試驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān)。 4. 試劑盒必須在有效期內(nèi)使用,每次實(shí)驗(yàn)均需做陰性對(duì)照和陽性對(duì)照,不建議不同批次的 相關(guān)試劑混用。 5. 在不同加樣步驟間及時(shí)更換吸頭,避免交叉污染,避免長時(shí)開蓋,使用移液器移液時(shí), 需避免液體掛壁,同時(shí)不同區(qū)域間的移液器和吸頭不能混用,需做到專區(qū)專用。 6. 試劑包裝如有破損或滴漏,嚴(yán)禁使用。 7. 操作人員萬一與皮膚、粘膜接觸,請(qǐng)立即用自來水清洗。 |
聲明 | 僅用于科研使用,不能用于臨床診斷和治療。 |
保存條件 | -20℃儲(chǔ)存,有效期24個(gè)月。 |