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無血清細(xì)胞凍存液

Serum-Free Cell Freezing Medium

產(chǎn)品貨號A400-500
產(chǎn)品規(guī)格500ml
目錄價格 ￥1600.00 元
產(chǎn)品編號A400-500
百迪全線產(chǎn)品僅供科研使用
產(chǎn)品信息
適用范圍 試劑
使用方法 （一） 細(xì)胞凍存
1. 取對數(shù)生長期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，加入 PBS 清洗細(xì)胞；
2. 去除 PBS，加入適量胰蛋白酶（覆蓋培養(yǎng)皿表面） 室溫孵育 2~3 min，把單層生長細(xì)胞消化下來；
3. 加入雙倍體積的完全培養(yǎng)基或胰酶終止劑終止細(xì)胞消化（如果凍存細(xì)胞為懸浮細(xì)胞按照步驟 4-8 進行操作）；
4. 將消化后的細(xì)胞懸液或者懸浮細(xì)胞液轉(zhuǎn)移至離心管中，進行細(xì)胞計數(shù)；
5. 室溫 1000 rpm 離心 5 min；棄掉上清液；
6. 加入適量 4℃預(yù)冷的無血清細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞沉淀，制成細(xì)胞懸液（按照細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計算所需凍存液的量，推薦凍存密度：5x105 至 1x107cells/mL；
7. 將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管 1～1.5 ml； 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時間及操作者等信息；
8. 針對常規(guī)腫瘤細(xì)胞：將凍存液重懸后的細(xì)胞直接放入-80℃冰箱，過夜后轉(zhuǎn)入至液氮罐中 長期保存。針對難養(yǎng)或珍貴細(xì)胞：將凍存液重懸后的細(xì)胞放入程序降溫盒，或者程序降溫后再放入-80℃冰箱，過夜后轉(zhuǎn)入至液氮罐中長期保存。

（二） 細(xì)胞復(fù)蘇
1. 將水浴鍋溫度調(diào)至 37℃，取出凍存管快速置于水浴鍋內(nèi)，晃動凍存管直至管中凍存細(xì)胞融化成液體；
2. 將溶解的細(xì)胞凍存懸液轉(zhuǎn)移至含有 5-10 倍體積完全培養(yǎng)基的離心管中，待凍存管中細(xì)胞完全融化后，將凍存細(xì)胞懸液緩慢加入離心管中，輕輕混勻；
3. 室溫 1000 rpm 離心 5 min； 去除上清液，加入已回溫的完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，進行細(xì)胞計數(shù)，根據(jù)計數(shù)結(jié)果，取適量的細(xì)胞懸液接種到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；
4. 將培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移至 37℃，5% CO2 培養(yǎng)箱中，按常規(guī)方法培養(yǎng)。
注意事項
1. 試劑包裝如有破損或滴漏，嚴(yán)禁使用。
2. 請遵守嚴(yán)格無菌的工作規(guī)范，操作過程避免污染。
3. 使用前應(yīng)詳細(xì)閱讀使用說明書，在有效期內(nèi)使用。 ?
4. 本產(chǎn)品含有 DMSO，建議用戶在低溫條件下（4℃或冰上）進行操作，凍存細(xì)胞后應(yīng)盡量減少凍存細(xì)胞在外存放時間，盡快按照步驟移入-80℃冰箱保存。
5. 部分對 DMSO 敏感的細(xì)胞，建議使用本產(chǎn)品前對其進行試驗性凍存、復(fù)蘇、培養(yǎng)，確認(rèn)細(xì)胞性能后再進行正式凍存。
6. 該產(chǎn)品在室溫條件下放置的時間不宜過長，以免影響凍存效率。
聲明 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。
保存條件 2°C-8°C保存，有效期18個月。
產(chǎn)品詳情

BDBIO無血清細(xì)胞凍存液是一款即用型無需程序降溫的細(xì)胞凍存試劑。廣泛適用于多種哺乳 動物細(xì)胞（腫瘤細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞）的凍存。產(chǎn)品經(jīng)過配方優(yōu)化，不含血清、動物源成分，含 有糖、氨基酸、優(yōu)質(zhì)白蛋白等營養(yǎng)物質(zhì)和更低的DMSO含量配比。大大提高了細(xì)胞的復(fù)蘇 率和活力，可用于細(xì)胞長期保存。


本產(chǎn)品不僅可以避免使用血清，降低血清中未知成分和病 毒等感染物質(zhì)給凍存帶來的影響與風(fēng)險，大多數(shù)腫瘤細(xì)胞可重懸于本產(chǎn)品后直接置于-80℃冰 箱長期保存，過夜后轉(zhuǎn)移到液氮種完成整個凍存過程。如果細(xì)胞比較珍貴，建議放置于程序 降溫盒或程序降溫后保存于-80℃冰箱，過夜后轉(zhuǎn)移到液氮中長期保存。

【產(chǎn)品用途】

適用于各種類型動物細(xì)胞株（腫瘤細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞系）無血清培養(yǎng)體系的細(xì)胞凍存，同時適用于含血清培養(yǎng)體系細(xì)胞的凍存。

 

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

指標(biāo)項 

標(biāo)準(zhǔn)值

外觀顏色 

紅色透明液體

pH 值   

6.8-8.0

滲透壓( mOsm/kg·H20) 

1000-1500

細(xì)菌 

陰性

真菌 

陰性

支原體 

陰性