| 適用范圍 | 試劑 |
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| 使用方法 | HEK293 細胞在略微偏酸性的環境下生長狀態較好，可順利貼壁生長，在細胞換液時，注意動作輕盈，避免細胞脫落。傳代之前將培養基置于水浴鍋中預熱至少 30min。 細胞傳代（以 T25 為例)： 1. 將細胞以 0.5×105cells/mL 接種，37℃，5%-8%的 CO2 培養 2 天后在顯微鏡中觀察細胞密度，若細胞密度大于 80%，即可按比例或細胞密度接種（復蘇后首次傳代建議按 1：2 傳代）；若細胞密度低于 70%，可以繼續培養細胞密度至 80%以上后傳代。 2. 盡量吸取干凈培養瓶中的原培養基，并加入 3-5 mL PBS 溶液輕輕潤洗細胞，潤洗完成后去掉 PBS。 3. 在培養瓶瓶中加入 1mL 消化胰酶并鋪勻至瓶底部細胞層，置于 37℃培養箱中孵育消化2 min。 4. 加入新鮮貼壁培養基終止消化，并用移液器輕輕沿瓶底吹打細胞，將懸浮細胞移至離心管中，200g，離心 5 min，棄上清。 5. 用新鮮培養基稀釋細胞至 0.5×105 cells/mL，并轉移至新的培養瓶中繼續培養。 細胞凍存： 1. 準備細胞凍存液：取 90%終體積的新鮮培養基于離心管中，加入10%的DMSO，混合均勻；也可用商品化細胞凍存液。 2. 先將細胞按傳代步驟進行消化、離心、棄上清，獲得細胞沉淀。 3. 并加入適量預先制備的細胞凍存液，稀釋細胞至1.0×106 cells/mL，使細胞完全重懸，將細胞分裝至凍存管中。 4. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80℃冰箱過夜。 5. 將程序降溫盒中的細胞轉移至液氮罐中保存。 |
| 注意事項 | 1. 培養基應置于2～8℃避光保存，避免反復凍融。 2. 培養基在使用前需在 37℃水浴鍋中進行預熱。 3. 培養瓶在轉移過程中避免劇烈搖晃。 4. 本產品使用過程中應注意無菌操作，避免污染。 5. 試劑包裝如有破損或滴漏，嚴禁使用。 |
| 聲明 | 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。 |
| 保存條件 | 2-8℃避光保存，有效期12個月 |
