2025年可能退市股票一览表-未来买什么股票-【东方资本】,今日大盘收盘价,股票开户要手续费吗,炒股软件哪个好使

首頁 > 技術文章 > 細胞培養 | MCF-7(Human breast cancer cells)
細胞培養 | MCF-7(Human breast cancer cells)



人乳腺癌細胞(Human breast cancer cells)MCF-7是從一名69歲的白人女性乳腺癌患者的胸腔積液中分離得到,為貼壁上皮樣細胞。MCF-7保留了分化乳腺上皮的許多特征,常用于乳腺癌生物學研究,乳腺癌抗癌藥物篩選等方面研究。

MCF-7細胞

百迪貨號C5103

細胞培養方法

1.培養基


89%MEM培養基;10%胎牛血清(FBS);1%青霉素-鏈霉素(P/S);其他細胞添加劑


2.復蘇

(1)解凍:用鑷子將凍存管浸于37 ℃水?。环磸蛽u晃,迅速完成解凍;

(2)離心:噴灑75%酒精消毒后,在無菌環境下,打開凍存瓶,用移液器將細胞連同凍存液移至含1 mL完全培養基的10 mL離心管中,室溫1200 rpm離心3-5 min,細胞沉于離心管底部;

(3)培養:將上清液輕輕棄去,加2 mL完全培養基,輕柔懸起細胞,然后將所有細胞懸液移至含有3 mL完全培養基的T25培養瓶中,于37℃,5% 二氧化碳培養箱中培養;

(4)觀察:每日觀察細胞生長狀態(培養基顏色、細胞貼壁情況、形態與密度等)并拍照。

3.傳代

細胞密度達80%-90%開始傳代

(1)清洗:無菌下吸出培養基,用37 ℃預熱的PBS清洗一次;

(2)消化:加1 mL 0.25%胰蛋白酶消化液,轉動培養瓶令其浸潤所有細胞,室溫(或37 ℃)消化,顯微鏡下觀察到細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回超凈臺,輕敲幾下培養瓶后加1 mL完全培養基終止消化;

(3)離心:用移液器輕柔吹勻后然后將懸液轉移至10mL離心管中,在1200 rpm離心3-5 min;

(4)培養:無菌下棄上清液,加1 mL完全培養基懸起細胞并移至T25培養瓶中;按1:2-1:3比例添加完全培養基,用移液器輕柔吹勻后,分裝至培養瓶中,于37 ℃,5% 二氧化碳培養箱中培養。


MCF-7細胞特點


成團簇的生長

由于MCF-7細胞是三維團簇的方式生長,復蘇和傳代后會重新附著為三維島(會有一些不會重新附著的簇)。生長最終會從島嶼狀慢慢擴散開來,隨著時間的推移,細胞會緩慢變成單層,這個時候細胞基本處于對數生長期。


生長緩慢

MCF-7人乳腺癌細胞是一種本身生長緩慢的細胞,傳代培養時注意細胞密度。當細胞培養至細胞 70~80% 的匯合度,即可進行分瓶處理,一般T25培養瓶建議1:2傳代,每周可傳代2~3次,如果細胞生長速度比正常的時候更慢,可以適當提高血清濃度。


貼壁率低

MCF-7細胞在復蘇、傳代后,細胞會有一些漂浮狀態,這些漂浮細胞是正常現象。一般復蘇、傳代培養3天后漂浮細胞會再繼續粘附貼壁,直到生長從島嶼擴散開來并且在培養瓶內伸展開,通常在進行換液的時候我們會補加培養基,如果一定要全換液,可以通過離心收集懸浮細胞,并將懸浮細胞接種到新培養瓶中。

買凍存液,送細胞!



去分享
來源網址:https://mp.weixin.qq.com/s/e2EokC65zcZDqbl16iX3MQ

上一篇

日期:2025-01-09

細胞培養 | NRK-52E

下一篇

日期:2024-05-17

細胞培養 | RAW 264.7(Mouse Monocytic Macrophage Leukemia Cell Line)